机制增殖细胞核抗原刺激皮瓣核酸内切酶1。
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汤姆年代,Henricksen洛杉矶,班巴拉族RA
机制增殖细胞核抗原刺激皮瓣核酸内切酶1。
生物化学杂志。2000年4月7日,275 (14):10498 - 505。
- PubMed ID
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10744741 (在PubMed]
- 文摘
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人类皮瓣核酸内切酶1 (FEN1),一个重要的DNA复制的蛋白质,劈开基质未退火的5的尾巴。FEN1显然追踪沿着皮瓣从5 '端到裂解位点。增殖细胞核抗原刺激FEN1乳沟5-50-fold。确定跟踪,绑定,或者乳沟被PCNA增强,我们测试了各种皮瓣基质。增殖细胞核抗原刺激的相似水平上发生一个cleavage-sensitive带切口的基质,而基质又创造存活其中不太敏感的缺口。PCNA刺激FEN1无论皮瓣长度。刺激发生pseudo-Y衬底,展品上游不需要乳沟。pseudo-Y衬底与要求的上游引物序列乳沟不是由细胞核抗原激活,表明PCNA不补偿基质特性,抑制乳沟。生物素。链霉亲和素结合的5 '端皮瓣结构防止FEN1加载。 The addition of PCNA does not restore FEN1 activity. These results indicate that PCNA does not direct FEN1 to the cleavage site from solution. Kinetic analyses reveal that PCNA can lower the K(m) for FEN1 by 11-12-fold. Overall, our results indicate that after FEN1 tracks to the cleavage site, PCNA enhances FEN1 binding stability, allowing for greater cleavage efficiency.