精氨酸残基47和70年人类皮瓣endonuclease-1参与DNA的衬底相互作用和裂解位点的决心。
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邱J, Bimston DN,沈Partikian A, B
精氨酸残基47和70年人类皮瓣endonuclease-1参与DNA的衬底相互作用和裂解位点的决心。
生物化学杂志。2002年7月5日,277 (27):24659 - 66。2002年5月1日Epub。
- PubMed ID
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11986308 (在PubMed]
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皮瓣endonuclease-1 (FEN-1)是一种DNA复制和修复的关键酶。密集的研究一直在进行其structure-specific核酸酶的活动,在酵母细胞生物功能。然而,它的特定的与DNA相互作用底物催化是没有定义的初始步骤。了解FEN-1的识别和结合能力皮瓣DNA衬底是至关重要的对其分子机制的阐明和解释可能的病理后果造成未能结合DNA。用人类FEN-1在这项研究中,我们发现了两个带正电的氨基酸残基,在人类FEN-1 Arg-47和参数- 70,候选人负责衬底绑定。突变的参数- 70显著减少皮瓣核酸内切酶活性和消除核酸外切酶活性。突变或质子化作用Arg-47乳沟网站与皮瓣转移衬底和核酸外切酶活性显著降低。我们发现这些改变是由于缺陷dna蛋白质相互作用。尽管单一Arg-47突变的影响绑定活动不是R70A那么严重,其与asp - 181双突变有协同效应。而且这些带正电的残留与可能的交互网站基础上,论述了DNA基质FEN-1乳沟模式使用不同的基质。 Finally data were provided to indicate that the observed negative effects of a high concentration of Mg(2+) on enzymatic activity are probably due to the competition between the arginine residues and metal ions with DNA substrate since mutants were found to be less tolerant.