绑定的分析1,3-diacetylchloramphenicol isotope-edited氯霉素乙酰转移酶,1 h NMR和定点诱变。
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吊杆JP,连LY,肖罗伯茨GC,西弗吉尼亚州
绑定的分析1,3-diacetylchloramphenicol isotope-edited氯霉素乙酰转移酶,1 h NMR和定点诱变。
生物化学。1992年9月8日,31 (35):8191 - 5。
- PubMed ID
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1525158 (在PubMed]
- 文摘
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二进制复杂diacetylchloramphenicol和氯霉素乙酰转移酶(CAT)研究了结合isotope-edited 1 h NMR光谱和定点诱变。一维HMQC光谱之间的复杂的1,3 - [2-13C] diacetylchloramphenicol和类型III的自然变异猫揭示了两个甲基1 h信号起源于13 c-labeled碳原子的乙酰基配体。缓慢水解酶杜绝3-acetyl集团的进一步分析二进制的复杂。可以减缓的速度水解催化地S148A缺陷突变体的利用CATIII (Lewendon et al ., 1990);的复杂与S148A diacetylchloramphenicol CATIII,绑定的乙酰基配体的化学变化在野生型一样复杂。乙酰基信号被分别分配通过重复实验使用1 - [2-13C], 3 - [2-12C] diacetylchloramphenicol,只有一个信号从观察结合配体。一个二维1 h, h NOESY实验,用13 c(ω2)half-filter 1, 3 - [2-13C] diacetylchloramphenicol / S148A CATIII复杂的分子间不显示号码从每个甲基在氯霉素残留的配体结合位点。3-acetyl组显示强烈的不两个芳香信号选择任务。的可能性不源于diacetylchloramphenicol本身的芳香质子被赋值的信号消除enzyme-bound diacetylchloramphenicol和氯霉素使用perdeuterated CATIII。检查x射线晶体结构的氯霉素/ CATIII二进制复杂表示四个可信的候选人芳香残留:日元F33 F103, F158。(抽象截断在250字)