鉴定人血浆蛋白作为细胞外伴侣聚簇素的主要客户。
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怀亚特·阿尔，威尔逊先生
鉴定人血浆蛋白作为细胞外伴侣聚簇素的主要客户。
中国生物化学杂志，2010年2月5日;285(6):3532-9。doi: 10.1074 / jbc.M109.079566。Epub 2009 12月7日。
- PubMed ID
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19996109 (PubMed视图］
- 摘要
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Clusterin (CLU)是一种细胞外伴侣蛋白，可能在蛋白质折叠质量控制中发挥重要作用。本研究通过研究在生理相关应激(剪切应激，37℃下约36达因/厘米(2))下形成的clus -client复合物，确定了三种沉积疾病相关蛋白作为clusterin的主要血浆客户端。通过尺寸排除色谱法分析血浆样本表明:(i)相对于对照血浆，应激血浆中含有更多高分子量可溶性蛋白物种，(ii)用抗clu免疫亲和层析法从应激血浆中纯化的蛋白质与从对照血浆中纯化的蛋白质相比，高分子量物种要丰富得多。SDS-PAGE和Western blot分析表明，应激血浆和对照血浆中均有多种与CLU共纯化的蛋白;然而，当血浆受到压力时，有几种蛋白质是唯一存在或更丰富的。质谱鉴定这些蛋白为铜蓝蛋白、纤维蛋白原和白蛋白。大小排除层析分离血浆的免疫点杂交分析表明，原位生成的cluc -client复合物非常大，可能达到>或=4 x 10(7) Da。最后，夹心酶联免疫吸附试验在应激血浆中检测到含有CLU和铜蓝蛋白、纤维蛋白原或白蛋白的复合物，而不是对照血浆。我们之前提出，clus -client复合物可以作为载体，通过受体介导的内吞作用处理体内受损的错误折叠的细胞外蛋白。对这些机制的更好理解可能最终导致对细胞外蛋白质沉积障碍的新疗法的识别。