角色His57-Glu214离子夫妇位于结核分枝杆菌FprA的活性部位。
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Pennati, Razeto A de罗莎M Pandini V, Vanoni MA Mattevi, Coda, Aliverti,萨内蒂G
角色His57-Glu214离子夫妇位于结核分枝杆菌FprA的活性部位。
生物化学。2006年7月25日,45 (29):8712 - 20。
- PubMed ID
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16846214 (在PubMed]
- 文摘
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结核分枝杆菌FprA NADPH-ferredoxin还原酶,功能和结构类似于哺乳动物的皮质铁氧还蛋白还原酶。它可能是参与提供电子的一个或多个病原体的细胞色素p450通过减少铁氧还蛋白。它的基础上提出了晶体数据(西,r . T。et al。(2002)生物化学41岁,8807 - 8818),侧链的高度保守His57和Glu214 H-bonded参与催化。残留物都是单独改变通过定点诱变nonionizable氨基酰基残留。稳态动力学表明,Glu214在催化的作用是微乎其微的。相反,替换的His57明显受损的催化效率FprA铁氧还蛋白的生理反应。Furthemore,他们降低了k(猫)/ k (m) NADPH的价值减少铁氰化物。快速反应(stopped-flow)孤立还原半反应的动力学分析野生型和His57Gln形式的FprA NADPH和NADH允许enzyme-bound时尚还原的机理的详细描述,识别所涉及的中间体。His57Gln突变引起了6倍减少的速度从NADPH或NADH氢化物转移到enzyme-bound时尚代数余子式。 The 3D structure of FprA-H57Q, obtained at 1.8 A resolution, explains the inefficient hydride transfer of the mutant in terms of a suboptimal geometry of the nicotinamide-isoalloxazine interaction in the active site. These data demonstrate the role of His57 in the correct binding of NADPH to FprA for the subsequent steps of the catalytic cycle to proceed at a high rate.