稳态和结核分枝杆菌泛酸酯合成酶pre-steady-state动力学分析。
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郑R,布兰查德JS
稳态和结核分枝杆菌泛酸酯合成酶pre-steady-state动力学分析。
生物化学。2001年10月30日,40(43):12904 - 12所示。
- PubMed ID
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11669627 (在PubMed]
- 文摘
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泛酸酯合成酶(EC 6.3.2.1),由panC基因编码,催化的本质ATP-dependent冷凝D-pantoate和beta-alanine形成泛酸盐细菌、酵母和植物。从结核分枝杆菌泛酸酯合成酶在大肠杆菌表达,纯化同质性,发现与亚基为33 kDa的分子质量。初始速度、产品和终端抑制动力学机制的研究显示泛酸酯合成酶Bi Uni Uni Bi乒乓球,与ATP结合紧随其后D-pantoate绑定,释放PP (i), beta-alanine绑定,其次是泛酸盐的释放和AMP。米歇利斯常数分别为0.13,0.8,和2.6毫米D-pantoate beta-alanine, ATP,分别和周转率,k (cat), 3.4 (1)。pantoyl腺苷酸的形成,建议作为一个关键的中间的动力学机制,证实了(31)P NMR光谱产生的[(18)O] AMP (18) O转移使用[羧基- (18)O] pantoate。Single-turnover反应形成的焦磷酸盐和泛酸盐测定使用快速淬火技术,并指出这两个半反应出现率最高的1.3 + / - 0.3和2.6 + / - 0.3秒(-)(1),分别符合pantoyl腺苷酸作为一个活动主管中间泛酸酯合成酶的反应。这些数据还表明,两个半反应部分病原。反向同位素交换[(14)C] -beta-alanine泛酸盐中观察AMP的存在,表明形成可逆的pantoyl腺苷酸的中间产品。