大鼠星形胶质细胞中一种Na+独立胆碱转运体的分子和功能特征。
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引用
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稻津M,武田H,松宫T
大鼠星形胶质细胞中一种Na+独立胆碱转运体的分子和功能特征。
神经化学杂志,2005 9月;94(5):1427-37。Epub 2005年7月5日。
- PubMed ID
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16000150 (PubMed视图]
- 摘要
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在本研究中,我们检测了体外培养的大鼠皮质星形胶质细胞摄取胆碱的分子和功能特征。星形胶质细胞摄取胆碱对细胞外Na+依赖性较小。不依赖Na+的胆碱吸收是饱和的,由单一转运系统介导,表观米氏常数(Km)为35.7 +/- 4.1微米,最大速度(Vmax)为49.1 +/- 2.0 pmol/mg蛋白/min。细胞外培养基酸化和膜去极化显著降低了胆碱的摄取。未标记的胆碱、乙酰胆碱和胆碱类似物半胆碱-3抑制了Na+不依赖的胆碱摄取。典型有机阳离子四己基铵(TEA)和其他正四烷基铵化合物(如四己基铵(TBA)和四己基铵(THA))抑制了Na+不依赖的胆碱摄取,其抑制作用顺序为THA > TBA > TEA。多种有机阳离子,如1-甲基-4-四氢吡啶(MPP+)、可乐定、奎宁、奎尼丁、胍、n -甲基烟酰胺、西咪替丁、去西帕明、苯海拉明和维拉帕米等,也与Na+不依赖的胆碱转运系统相互作用。皮质酮和17 β -雌二醇,已知的有机阳离子转运蛋白3 (OCT3)抑制剂,没有引起任何显著的抑制作用。然而,抑制oct的decynium22显著抑制了Na+不依赖的胆碱摄取。RT-PCR显示星形胶质细胞表达低水平的OCT1、OCT2和OCT3 mRNA,但其摄取胆碱的功能特征与这些oct的已知性质有很大不同。 The high-affinity Na+-dependent choline transporter, CHT1, is not expressed in astrocytes as evidenced by RT-PCR. Furthermore, mRNA for choline transporter-like protein 1 (CTL1), and its splice variants CTL1a and CTL1b, was expressed in rat astrocytes, and the inhibition of CTL1 expression by RNA interference completely inhibited Na+-independent choline uptake. We conclude that rat astrocytes express an intermediate-affinity Na+-independent choline transport system. This system seems to occur through a CTL1 and is responsible for the uptake of choline and organic cations in these cells.