恶性疟原虫ferredoxin-NADP +还原酶His286扮演双重角色的NADP (H)绑定和催化
文章的细节
-
引用
复制到剪贴板 -
Crobu D, Canevari G,米拉尼M, Pandini V, Vanoni MA Bolognesi M,萨内蒂G, Aliverti
恶性疟原虫ferredoxin-NADP +还原酶His286扮演双重角色的NADP (H)绑定和催化
生物化学。2009年10月13日,48(40):9525 - 33所示。doi: 10.1021 / bi9013209。
- PubMed ID
-
19736991 (在PubMed]
- 文摘
-
恶性疟原虫的NADP-binding网站ferredoxin-NADP(+)还原酶包含两个基本的残留物,His286 Lys249,守恒的疟原虫属中,但不是在其他株型同系物。以前的晶体研究表明His286与腺嘌呤环和5 '磷酸2 ' -P-AMP,腺苷酸基的配体,模仿NADP (H)在这里,我们表明,更换His286与脂肪族残留结果在减少酶的亲和力NADPH和k (cat),减少由于降低了氢化物转移率。出乎意料,突变Gln产生酶比野生型更活跃,而改变赖氨酸撼动nicotinamide-isoalloxazine交互,减少k (cat)。的晶体结构的基础上,选择突变体包裹着2》-P-AMP,我们得出这样的结论:His286侧链中扮演着双重角色在催化提供结合能NADPH和有利于催化地能力取向的烟酰胺环。对于后者函数,H-bonding潜力而不是带正电的His286咪唑似乎足够了。此外,我们表明,Lys249Ala突变降低K (m) (NADPH)和K (d)为辅酶ii(+)或2”-P-AMP 10倍。我们建议Lys249侧链相互作用参与底物识别的2的磷酸盐是nad (H),这种交互中没有观察到晶体形式的酶2的-P-AMP复杂由于构象substrate-binding循环的扰动引起的二聚作用。