表达功能的人类在杆状病毒系统:谷氨酰胺酶亲和纯化、动能和分子鉴定。
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Campos-Sandoval是的,洛佩兹de la奥利瓦,Lobo C, Segura是的,配偶JM,阿隆索FJ,马尔克斯J
表达功能的人类在杆状病毒系统:谷氨酰胺酶亲和纯化、动能和分子鉴定。
Int细胞杂志。2007;(4):765 - 73。Epub 2006年12月21日。
- PubMed ID
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17267261 (在PubMed]
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谷氨酰胺酶催化水解的谷氨酰胺的化学计量的谷氨酸加铵离子。在哺乳动物中,有两个不同的基因编码为谷氨酰胺酶,称为肝(左)和肾(K)类型。杆状病毒表达的人类l型异构体产生功能性重组酶Sf9昆虫细胞。一种新型亲和色谱法方法,基于其特定的交互PDZ蛋白质,净化了。净化人类同工酶动力学常数测定,显示谷氨酰胺的变构行为,希尔指数为2.7和S的32和64毫米(0.5)值高、低P (i)的浓度,分别。而蛋白质显示低P (i)依赖典型的l型谷氨酰胺酶,这种酶出乎意料地抑制谷氨酸,k的动力学特性独家同功酶,并略激活氨,不像古典肝酶显示绝对依赖氨。亚细胞分离表明重组人类谷氨酰胺酶针对线粒体和细胞核和蛋白质催化地活跃在两个位置。这是第一次报告的功能l型哺乳动物谷氨酰胺酶酶的表达。该研究还提供了一种简单而有效的方法重组酶的亲和纯化。此外,数据表明,这人类酶可能代表一个新的同种型不同于古典肾脏和肝脏同功酶。
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