基因定点突变在豚鼠肝守恒的阴离子地区转谷氨酰胺酶。
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Ikura K、C, Nagao M,佐佐木R, Furuyoshi年代,川端康成N
基因定点突变在豚鼠肝守恒的阴离子地区转谷氨酰胺酶。
拱生物化学Biophys。1995年4月20日,318(2):307 - 13所示。
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7733658 (在PubMed]
- 文摘
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转谷氨酰胺酶(EC 2.3.2.13)催化形成的ε- (gamma-glutamyl)赖氨酸交叉连接和基本胺替代gamma-carboxamide组蛋白结合的谷氨酰胺残基。转谷氨酰胺酶守恒的阴离子的地区,其中一些被认为是可能的钙结合网站。通过定点诱变,三个突变体形式的重组豚鼠肝转谷氨酰胺酶,一些酸性氨基酸残基在两个守恒的地区成为非离子,在大肠杆菌表达:TGM1,与asp Asn - 231年和-232年改变了;TGM2, glu - 445, -448, -449, -450,和-452年改为Gln;和TGM3 TGM1和TGM2的突变。突变体的大小和水平的合成蛋白质时不变进行免疫印迹。保留所有突变体酶活性,明显的Km值基质中组胺并入乙酰αs1-casein与野生型酶相似,但是他们的Vmax值小。脱氨基的乙酰基αs1-casein谷氨酰胺残基是不受影响,但蛋白质交联催化这些突变体是非常低的。所有突变引起的酶激活的敏感性钙和减少敏感性的增加通过三磷酸鸟苷抑制。这些结果表明,一些酸性的负电荷氨基酸残基的两个守恒的阴离子地区转谷氨酰胺酶不是必不可少的活动但是负电荷的丧失会影响一些催化性质。
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