一种新型双亮氨酸基序介导K(+)/Cl(-)共转运体KCC2的本构内吞作用。
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赵B，王AY，默希德A，鲍伊D，普雷斯利JF，贝德福德FK
一种新型双亮氨酸基序介导K(+)/Cl(-)共转运体KCC2的本构内吞作用。
手机信号。2008年10月;20(10):1769-79。doi: 10.1016 / j.cellsig.2008.06.011。Epub 2008 6月24日。
- PubMed ID
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18625303 (PubMed视图］
- 摘要
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神经元特异性氯化钾共转运蛋白2 (KCC2)通过控制氯挤压，在抑制性神经传递的发展和维持中起着至关重要的作用。虽然现在已经确定，活性依赖机制可以下调KCC2基因表达，但翻译后机制在控制KCC2表达中的作用，特别是在细胞表面，尚不清楚。因此，我们开始鉴定调节KCC2内吞的机制和基序，这可能是控制KCC2膜表达的一个重要途径。使用基于荧光的检测，我们发现KCC2在HEK293细胞中表达时，是通过动力蛋白和网格蛋白依赖的途径构成内化的。与此一致的是，我们在体内证明了来自成年小鼠大脑的KCC2与网格蛋白结合适配器蛋白-2 (AP-2)复合物相关联。利用内吞报告系统，我们在KCC2的羧基细胞质末端鉴定了一个自主内吞基序的存在。通过位点定向突变，我们将这个新的KCC2内吞基序定义为非典型的双亮氨酸基序(657)LLXXEE(662)。最后，通过在全长KCC2的背景下突变这个基序，我们证明了这个新的KCC2内吞基序对于KCC2的本构内化和与AP-2复合物结合是必不可少的。随后的序列分析表明，该motif在密切相关的K(+)/Cl(-)家族成员之间高度保守，而在控制氯流入的远亲共转运蛋白中不存在。总之，我们的结果表明KCC2的本构内化是网格蛋白介导的，依赖于AP-2与这种新型内吞基序的结合。 Furthermore, that this process appears to be an evolutionarily conserved mechanism amongst functionally homologous cotransporters.