甲氨蝶呤和氨基蝶呤质子化与二氢叶酸还原酶结合的碳-13核磁共振研究。
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cocoo L, Groff JP, Temple C Jr, Montgomery JA, London RE, Matwiyoff NA, Blakley RL
甲氨蝶呤和氨基蝶呤质子化与二氢叶酸还原酶结合的碳-13核磁共振研究。
生物化学。1981 7月7日;20(14):3972-8。
- PubMed ID
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7284303 (PubMed视图］
- 摘要
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用13C富集90%的C-2合成了甲氨蝶呤、氨基蝶呤和叶酸。13C核磁共振已被用来检查这些化合物的蝶啶环在不同条件下的质子化状态，并给出了比大多数其他方法更明确的结果。游离化合物的pK值为:甲氨蝶呤，5.73 +/- 0.02 (N-1);氨基蝶呤，5.70 +/- 0.03 (N-1);叶酸，2.40 (N-1)和8.25 +/- 0.05 (N-3, O-4酰胺组)。当这些化合物与二氢叶酸还原酶(来自粪链球菌的同工酶2)络合时，质子化状态也在pH值6- 10范围内进行了研究。结合甲氨蝶呤的共振在整个研究的pH范围内显示出恒定的化学位移，并且推断在配合物中蝶啶环仍然质子化到至少pH 10。氨基蝶呤与还原酶的二元配合物，以及甲氨蝶呤或氨基蝶呤与还原酶与NADPH4的三元配合物均得到了相同的结果。后者是一种与NADPH竞争的还原酶抑制剂。然而，在二元或三元配合物中与还原酶结合的叶酸表现出与自由态相同的质子化行为。 The data indicate that the association constant for binding of methotrexate is increased enough when protonation of N-1 occurs to account for the enhanced binding of methotrexate as compared with folate.