的表达在大肠杆菌细胞色素P450 2 a6:净化、光谱和催化特性,制备多克隆抗体。

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Soucek P

的表达在大肠杆菌细胞色素P450 2 a6:净化、光谱和催化特性,制备多克隆抗体。

拱生物化学Biophys。1999年10月15日,370 (2):190 - 200。doi: 10.1006 / abbi.1999.1388。

PubMed ID

10510277 (在PubMed

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文摘

细胞色素P450 (CYP) 2 a6是人类的主要酶催化香豆素7-hydroxylation和已知参与氟烷的新陈代谢,尼古丁,丁二烯的代谢活化和亚硝胺。本文的表达在大肠杆菌体内CYP2A6基因表现报告。为了实现表达,蛋白质分子的n端被PCR诱变改良。只有一个氨基酸的氨基端变异改变显示表达式体内CYP2A6基因表现210 nmol / l的文化。体内CYP2A6基因表现重组蛋白纯化电泳同质性,进一步为特征。绝对光谱是典型的CYP蛋白质和表示分离蛋白质的低自旋特征。由于疏水段的n端氨基酸序列的重组体内CYP2A6基因表现屏蔽。氨基formylmethionine块是被轻微的酸处理。净化体内CYP2A6基因表现向标记底物有很好的催化活性香豆素在重组系统(K (m) = 1.48 + / - 0.37 microM, V (max) = 3.36 + / - 0.18 nmol产品/分钟/ nmol CYP)。重组系统的活动刺激的细胞色素b(5)、谷胱甘肽。 CYP2A6 was shown to metabolize chlorzoxazone in the reconstituted system with activity of 0.32 nmol of product/min/nmol of CYP, and thus caution should be taken when interpretation of CYP2E1 in vivo phenotyping data is performed. Rabbit polyclonal antibodies were produced against recombinant CYP2A6 and proved to be very useful for immunoblotting and immunoinhibition studies. Availability of this expression system and specific antibodies should facilitate characterization of the role of CYP2A6 in the metabolism of chemicals and in the study biological relevance of genetic polymorphisms of this enzyme.

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药物	酶	类	生物	药理作用	行动
Chlorzoxazone	细胞色素P450 2 a6	蛋白质	人类	未知的	底物	细节