突变发现两个镁离子的作用腺苷酸环化酶的催化机理。
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引用
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齐默尔曼G,周D, Taussig R
突变发现两个镁离子的作用腺苷酸环化酶的催化机理。
生物化学杂志。1998年7月31日;273 (31):19650 - 5。
- PubMed ID
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9677392 (在PubMed]
- 文摘
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最近的腺苷酸环化酶的晶体结构测定阐明许多酶的结构特点,确定监管性质。此外,腺苷酸环化酶的鉴定诱变技术和结合位点的识别p区抑制剂导致建模研究,描述了腺苷的网站。尽管有这些进展,腺苷酸环化酶的催化机制仍然是不确定的,尤其是对镁离子可能在这个过程中扮演的角色。我们已经确定了四个突变哺乳动物腺苷酸环化酶缺陷的金属的依赖,使我们进一步描述金属离子的作用在这种酶的催化机理。野生型腺苷酸环化酶显示了两相的Mg2 +剂量反应曲线的高亲和性的组件显示协同(希尔系数1.4)。两个突变(C441R和Y442H)减少的腺苷酸环化酶的亲和力Mg2 +显著而不影响MgATP的绑定,这表明有一个金属的要求除了ATP-bound Mg2 +。这项研究的结果也证明腺苷酸环化酶的多个金属需求和支持的存在Mg2 +离子催化和有别于ATP-bound离子所必需的。我们建议,腺苷酸环化酶采用类似于DNA聚合酶的催化机制,在这两个关键的镁离子促进3 '羟基组的亲核攻击和随后消除焦磷酸。
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