谷氨酸- γ -单羟氨酸和羟胺是大肠杆菌天冬酰胺合成酶B的交替底物。

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博莱因SK，舒斯特SM，理查兹NG

谷氨酸- γ -单羟氨酸和羟胺是大肠杆菌天冬酰胺合成酶B的交替底物。

生物化学。1996 3月5日;35(9):3031-7。doi: 10.1021 / bi952505l。

PubMed ID

8608142 (PubMed视图

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摘要

大肠杆菌天冬酰胺合成酶B (AS-B)催化由天冬氨酸和谷氨酰胺在atp依赖性反应中合成天冬酰胺。研究了该酶使用羟胺和l -谷氨酸γ -单羟氨酸(LGH)分别作为替代底物代替氨和l -谷氨酰胺的能力。该酶能够作为酰胺水解酶发挥作用，从LGH中释放羟胺，具有较高的催化效率，以k(cat)/ k(M)衡量。此外，羟胺在AS-B合成酶活性中的动力学参数与氨的动力学参数非常相似。氮从LGH转移到生产天冬氨酸β -单羟氨酸也由AS-B催化。虽然已经对trpG酰胺转移酶家族的少数成员进行了这样的观察，但我们的结果似乎是第一次证明氮转移可以从purF酰胺转移酶中的谷氨酰胺类似物发生。然而，相对于依赖谷氨酰胺的天冬酰胺合成，依赖atp的羟胺从LGH转移到天冬氨酸的k(cat)/ k(M)降低了3倍。此外，天门冬酰胺被丙氨酸(N74A)取代的as - b突变体也可以使用羟胺作为氨的替代底物，催化LGH的水解。对于N74A AS-B突变体，LGH和l-谷氨酰胺向β -天冬酰胺转移氮的催化效率(k(cat)/ k(M))几乎相同。这些观察结果支持了Asn-74在催化谷氨酰胺依赖的氮转移中发挥作用的建议。 We interpret our kinetic data as further evidence against ammonia-mediated nitrogen transfer from glutamine in the purF amidotransferase AS-B. These results are consistent with two alternate chemical mechanisms that have been proposed for this reaction [Boehlein, S. K., Richards, N. G. J., Walworth, E. S., & Schuster, S. M. (1994) J. Biol. Chem. 269, 26789-26795].

引用本文的药物库数据

药物靶点

药物	目标	种类	生物	药理作用	行动
谷氨酸	天冬酰胺合成酶[谷氨酰胺水解]	蛋白质	人类	未知的	不可用	细节