调控ARF-mdm2相互作用和复合物核仁定位的合作信号。
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Weber JD, Kuo ML, Bothner B, DiGiammarino EL, Kriwacki RW, Roussel MF, Sherr CJ
调控ARF-mdm2相互作用和复合物核仁定位的合作信号。
Mol细胞生物学2000 4月;20(7):2517-28。doi: 10.1128 / mcb.20.7.2517 - 2528.2000。
- PubMed ID
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10713175 (PubMed视图］
- 摘要
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ARF肿瘤抑制蛋白通过拮抗p53的负调控因子Mdm2(人类中的Hdm2)来稳定p53。小鼠p19(ARF)和人类p14(ARF)都结合在Mdm2的中心区域(残基210 ~ 304)，这一段与Mdm2 E3泛素连接酶活性所需的n端p53结合域、核输入或输出信号或c端RING结构域不重叠。小鼠p19(ARF)的n端37个氨基酸是与Mdm2结合、Mdm2定位到核仁以及p53依赖的细胞周期阻滞所必需和充分的。尽管核仁定位信号(NrLS)映射在人p14(ARF)蛋白的不同片段(残基82至101)中，但与Mdm2的结合和ARF-Mdm2复合物的核仁导入对于小鼠或人ARF蛋白诱导的细胞周期阻滞都是必需的。由于小鼠ARF mRNA的许多密码子不被最丰富的细菌tRNAs识别，我们合成了含有首选细菌密码子的ARF微基因。使用细菌产生的ARF多肽和化学合成的与Sepharose结合的多肽，发现小鼠p19(ARF)的残基1 ~ 14和26 ~ 37与Mdm2独立和合作相互作用，而15 ~ 25残基是不可结合的。矛盾的是，在缺少Mdm2的情况下，小鼠p19(ARF)的26 - 37残基对于ARF核仁定位也是必不可少的。然而，p19(ARF)-Mdm2复合物进入核仁也需要Mdm2 c端RING结构域内的一个隐式NrLS。Mdm2 NrLS在ARF结合时被揭开，它的缺失阻止了ARF-Mdm2复合物进入核仁。总的来说，这些结果表明ARF与Mdm2结合诱导了构象变化，促进了ARF-Mdm2复合物的核仁导入和p53依赖的细胞周期阻滞。 Hence, the ARF-Mdm2 interaction can be viewed as bidirectional, with each protein being capable of regulating the subnuclear localization of the other.