人类巨细胞病毒与IE-2 (UL122)删除失败早期裂解基因表达。

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朱出面协调,刘H, H

人类巨细胞病毒与IE-2 (UL122)删除失败早期裂解基因表达。

J微生物学报。2001年2月,75 (4):1870 - 8。doi: 10.1128 / jvi.75.4.1870 - 1878.2001。

PubMed ID

11160686 (在PubMed

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文摘

很多证据表明,主要即早期(IE)人类巨细胞病毒的反式激活因子()血巨细胞病毒,IE-2,可能是有效的病毒复制的关键;然而,缺乏一个IE-2突变妨碍了血巨细胞病毒的实验测试这个假说。作为最初的一步描述IE-2突变,我们第一只克隆汤血巨细胞病毒基因组细菌人工染色体(BAC)的能力和分析DNA转染Towne-BAC (T-BACwt)产生斑块后引入宽容人类成纤维细胞。像汤病毒DNA, DNA转染T-BACwt传染性在宽容的细胞,以及由此产生的病毒股票与市镇病毒是没有区别的。然后我们使用同源重组大肠杆菌删除大多数UL122,开放阅读框编码IE-2独特的部分,从T-BACwt。从这个删除BAC,三分之一的BAC克隆删除与野生型创建UL122修理。在众多的宽容与这三个人包皮成纤维细胞转染DNA BAC克隆,救出了BAC和T-BACwt持续产生斑块,而UL122突变BAC从未产生斑块,即使4周。蛋白质和其他即基因的信使rna从转染UL122容易检测到突变BAC DNA;然而,一未能发现任何五个早期基因mRNA表达。这个突变体的广义故障早期基因表达与预期一致从在体外实验中已经证明IE-2 transactivates大多数推动者血巨细胞病毒。 These experiments provide the first direct demonstration that IE-2 is required for successful HCMV infection and indicate that virus lacking IE-2 arrests early in the replication cycle.

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