天然泪液替代品在完全定义的人角膜上皮细胞培养模型中的毒性。
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葛林G,丹尼尔斯JT,达特JK,克里IA,许PT
天然泪液替代品在完全定义的人角膜上皮细胞培养模型中的毒性。
中华眼科杂志2001 04;42(5):948-56。
- PubMed ID
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11274071 (PubMed视图]
- 摘要
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目的:血清和唾液最近被提倡作为难治性水分缺乏性干眼症的天然泪液替代品,但这些液体对角膜上皮的影响尚未得到很好的表征。在一个确定的测试模型中进行了一项实验室研究,以比较天然泪液替代品和药物泪液替代品的毒性,并确定天然泪液替代品中的潜在毒性因素,如淀粉酶、低张力和制剂的变化。方法:原代人角膜上皮细胞用确定的无血清角质形成细胞培养基培养。将细胞与羟丙醇糖(羟丙基甲基纤维素0.3%)、0.01%苯扎氯铵、不同渗透压的唾液、100%血清和50%血清(1:1 vol/vol, 0.5%氯霉素)孵育不同时间和浓度。毒性研究通过四种方式进行。用扫描电镜观察微绒毛密度。荧光钙黄素- am /乙二聚体染色后分析细胞膜通透性和细胞内酯酶活性,荧光素-荧光素酶法定量细胞三磷酸腺苷(ATP)。结果:泪液替代品的毒性等级在所有测定中均相关。ATP检测最敏感,其次是乙粒细胞通透性,最后是酯酶活性。保存的羟丙纤维素比未保存的制剂毒性更大。 Among natural tear substitutes, natural saliva was most toxic. Isotonic saliva and 50% serum were of similar toxicity, and 100% serum was least toxic. Natural tear substitutes were-except for natural saliva-less toxic than unpreserved hypromellose. Hypotonicity, but not amylase, was the major toxic effect associated with saliva. The dilution of serum with chloramphenicol induced toxicity. CONCLUSIONS: This is the first toxicity study using human primary corneal epithelial cells cultured under fully defined conditions as an in vitro model. Cellular ATP is a sensitive parameter for quantifying toxicity. Isotonic saliva and serum offer greater therapeutic potential for severely aqueous-deficient dry eyes than do pharmaceutical tear substitutes.
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