关键影响因素由氢氧化钠朊病毒失活。
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鲍曼PA,劳伦斯•LA Biesert L, Dichtelmuller H, Fabbrizzi F, Gajardo R,格,Jorquera霁,Kempf C, Kreil TR,冯·Hoegen我Pifat DY,老特小,Cai K
关键影响因素由氢氧化钠朊病毒失活。
Vox唱歌。2006年7月,91 (1):34-40。doi: 10.1111 / j.1423-0410.2006.00790.x。
- PubMed ID
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16756599 (在PubMed]
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背景和目的:传染性海绵状脑病(tse)是致命的神经退行性疾病引起的异常细胞蛋白质折叠(PrP (Sc);朊病毒),通常都对传统pathogen-inactivation技术。确保有效的去污和失活的朊病毒存在于源材料,我们研究了关键因素影响由氢氧化钠朊病毒失活。材料与方法:减少朊病毒传染性与protease-resistant朊蛋白的核心的消失(PrPRES)中观察到的生化指标。朊病毒失活模型,仓鼠痒病(应变263 k)脑匀浆(SBH)孵化为特定的时间在0.1 m氢氧化钠在4 - 18摄氏度,有或没有洗涤剂。中和样品受到限制和蛋白酶K消化(PK),然后通过一个端点稀释分析免疫印迹分析和抗体3 f4。的结构性变化朊病毒暴露在氢氧化钠进行使用微分免疫沉淀反应。结果:治疗SBH 0.1 m氢氧化钠为15分钟,没有清洁剂,在4和18摄氏度造成减少PrP log10 (RES)信号的3.5和4.0单位,分别与一些剩下的残余信号。洗涤剂的存在sarkosyl在氢氧化钠点孵化期间进一步加强PrPRES减少单位>、= 4.5 log10(即低于检测极限)。氢氧化钠处理诱导PrP构象的变化,导致一个隐藏的抗原决定基的接触和启用朊病毒免疫沉淀反应的抗体3 f4。 CONCLUSIONS: The use of NaOH can effectively reduce prion levels in an in vitro inactivation assay. After pretreatment of SBH with detergent, NaOH completely eliminates the PrPRES signal. Detergent may liberate lipid membrane-protected PrPSc to improve access to NaOH, which can then inactivate PrPSc by altering its structure. In cases of unidentified exposure to PrPSc during manufacturing, sanitizing procedures combining the use of detergent and NaOH may help to ensure minimal levels of contamination carryover in products.
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