突变的参数- 115人类的第三类乙醇脱氢酶:绑定网站所需甲醛脱氢酶活性和脂肪酸激活。
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Engeland K,这位乔,Holmquist B, Estonius M, Jornvall H,法兰提单
突变的参数- 115人类的第三类乙醇脱氢酶:绑定网站所需甲醛脱氢酶活性和脂肪酸激活。
《美国国家科学院刊S a . 1993年3月15日,90 (6):2491 - 4。
- PubMed ID
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8460164 (在PubMed]
- 文摘
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脂肪酸活化的起源和甲醛脱氢酶活动区分人类第三类乙醇脱氢酶(酒精:NAD +氧化还原酶,EC 1.1.1.1)从所有其他酒精脱氢酶已经被定点诱变的参数检查- 115残渣。阿拉巴马州和asp - 115突变体蛋白在大肠杆菌表达和纯化亲和色谱法和离子交换高效液相色谱法。本地重组和突变酶的活动对乙醇本质上是相同的,但诱变大大降低了kcat glutathione-dependent甲醛氧化/ Km值。Asp变体的催化效率是< 0.1%的不突变酶,由于更高的公里和kcat价值较低。与原生酶一样,既不突变可以氧化甲醇,由乙醇饱和,或被4-methylpyrazole抑制;即。第三,他们保留这些类的特征。然而,相比之下,他们的激活脂肪酸,独特的第三类乙醇脱氢酶,另一个特点是明显减弱。Ala突变激活仅略,但Asp突变是不激活。结果强烈表明,参数- 115第三类乙醇脱氢酶是一个组件的绑定网站激活脂肪酸和至关重要的绑定S-hydroxymethylglutathione glutathione-dependent甲醛脱氢酶的活动。