描述的cDNA克隆对人类NAD(+)特殊异柠檬酸脱氢酶alpha-subunit和结构比较不同物种的同功酶。
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描述的cDNA克隆对人类NAD(+)特殊异柠檬酸脱氢酶alpha-subunit和结构比较不同物种的同功酶。
j . 1995 5月15日,308 (Pt 1): 63 - 8。
- PubMed ID
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7755589 (在PubMed]
- 文摘
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0.6 kb cDNA片段编码人类NAD(+)特殊异柠檬酸脱氢酶alpha-subunit (H-IDHα)放大了PCR使用寡核苷酸引物合成的基础上猪胰蛋白酶的肽序列(黄和科尔曼(1990)生物化学29岁,8266 - 8273]。与放大cDNA探针,cDNA克隆IDHα是孤立的人类心脏λgt11 cDNA文库。推断蛋白质序列最大的cDNA克隆(2628个基点)呈现的前体蛋白366个氨基酸(39591 Da)和一个成熟的339个氨基酸的蛋白质(36640 Da)。推断H-IDHα蛋白序列是高度相似的部分肽序列猪酶。55,43岁,44%的一致,酵母NAD(+)特殊IDH2,酵母NAD(+)特殊IDH1和猴子NAD(+)特殊IDH gamma-subunit分别(IDHγ)。但是,它有更少的相似性(大约30%)辅酶ii(+)特殊IDH从大肠杆菌和牛线粒体。这些结果表明,IDHα的结构相似IDH2,酵母的催化亚基酶。推断H-IDHα蛋白的结构分析表明,氨基酸负责异柠檬酸的绑定,Mg2 +和NAD +是高度保守的。它也有两个守恒的图案ATP和ADP的结合位点,但规范Ca(2 +)绑定的主题并不认可。不寻常的五- (ATTTA)和三(TAA或ATT)核苷酸分别认为与rna结合蛋白和核酸内切酶乳沟附近的网站经常被公认在其3 '翻译区,表明额外的可能性这种酶的调节方法。 Northern-blot analysis suggests that one mRNA transcript (2.8 kb) exists in cultured HeLa cells. Genomic DNA Southern-blot analysis indicates that the IDH alpha gene is not closely related to that of the other IDH isoenzymes, and IDH alpha appears to be encoded by a single gene.