检测NIDDM患者的胰岛素受体基因的突变单链构象多态性分析。
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O的摄影,崔WH Patel P,特纳RC,传单JS,莫勒德
检测NIDDM患者的胰岛素受体基因的突变单链构象多态性分析。
糖尿病。1991年6月,40 (6):777 - 82。
- PubMed ID
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2040394 (在PubMed]
- 文摘
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我们使用了单链conformation-polymorphism最近描述技术(SSCP)分析检查胰岛素受体位点。首先,能力的方法来检测突变和多态性在胰岛素受体编码序列进行评估。包含16个不同地区的胰岛素受体序列核苷酸变化,9在病人基因组DNA和7在质粒克隆cDNA,进行了分析。所有9个病人基因组DNA突变质粒突变体7投5中展出变体SSCP模式。调查潜在的筛查技术的许多患者,5个外显子编码胰岛素受体的酪氨酸激酶域检查在30白色主题无关的非胰岛素依赖型糖尿病(NIDDM)。是17 - 21外显子区间放大从基因组DNA聚合酶链反应和接受SSCP分析。外显子19、20和21显示没有异常迁移的乐队,这表明这些序列的高度保护。一个糖尿病主题有一个外显子18 SSCP变体。这个问题直接测序的基因组DNA显示杂合的错义突变(Lys1068——Glu1068)。五个不同的SSCP模式中发现外显子17。 Based on direct sequencing, these patterns were explained by combinations of three different nucleotide substitutions, two of which were common silent polymorphisms. One subject had a heterozygous missense mutation Val985---- Met985. Allele-specific oligonucleotide hybridization confirmed the presence of these mutations in the appropriate diabetic subjects and also detected the Val985 mutation in heterozygous form in 1 of 13 nondiabetic white subjects. SSCP analysis is a sensitive rapid method for screening for mutations in the insulin-receptor gene.(ABSTRACT TRUNCATED AT 250 WORDS)