人脯氨酰基4-羟化酶α -亚基的分子克隆:完整的cdna来源氨基酸序列和RNA转录本选择性剪接的证据。
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Helaakoski T, Vuori K, Myllyla R, Kivirikko KI, Pihlajaniemi T
人脯氨酰基4-羟化酶α -亚基的分子克隆:完整的cdna来源氨基酸序列和RNA转录本选择性剪接的证据。
中国科学院学报(自然科学版)1989年6月;86(12):4392-6。
- PubMed ID
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2543975 (查看PubMed］
- 摘要
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脯氨酸4-羟化酶[原胶原脯氨酸，2-羟化戊二酸4-双加氧酶;前胶原- l -脯氨酸，2-氧戊二酸:氧氧化还原酶(4-羟化)，EC 1.14.11.2]，是一种- 2- - 2四聚体，通过肽键中脯氨酸残基的羟化，催化胶原中4-羟脯氨酸的形成。我们在此报道了从人肿瘤HT-1080、胎盘和成纤维细胞cDNA文库中分离编码酶α -亚基的cDNA克隆。8个重叠克隆覆盖了几乎所有对应的3000个核苷酸mRNA，包括所有的编码序列。这些克隆编码517个氨基酸残基的多肽和17个氨基酸的信号肽。先前对脯氨酰基4-羟化酶-亚基cDNA克隆的表征表明，它的C端具有Lys-Asp-Glu-Leu的氨基酸序列，这被认为是内质网腔内多肽保留的必要条件。α -亚基没有这个c端序列，因此-亚基在脯氨酰基4-羟化酶四聚体中的一个功能似乎是将酶保留在细胞器内。有趣的是，其中三个α -亚基的cDNA克隆包含64个核苷酸序列，与其他四个cDNA克隆中相应的64个核苷酸序列同源，但不完全相同。核酸酶S1映射实验表明，这种差异是由于两种mRNA的存在量大致相等。用α -亚基的cDNA探针对人类基因组DNA进行的Southern blot分析表明，只有一个基因编码两种类型的mRNA，这似乎是一个基因的初级转录本相互排斥的选择性剪接的结果。