人乳酸脱氢酶变体——LDHB GUA1活性位点上精氨酸到色氨酸的取代:对亚基结构和催化的假设影响。
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Shonnard GC, Hud NV, Mohrenweiser HW
人乳酸脱氢酶变体——LDHB GUA1活性位点上精氨酸到色氨酸的取代:对亚基结构和催化的假设影响。
生物化学学报。1996 1月17日;1315(1):9-14
- PubMed ID
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8611651 (PubMed视图］
- 摘要
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乳酸脱氢酶(LDHB GUA1)的一种变体此前在巴拿马和哥斯达黎加的瓜伊米印第安人中被发现。LDHB GUA1变体具有酶活性;然而，变体亚基改变了包括活性LDHA和LDHB亚基在内的四聚体的电泳迁移能力。四聚体酶由非活性B和活性A亚基组成，除了比活性降低外，其动力学性质与具有活性B亚基的异四聚体相似。我们已经确定，在氨基酸残基106处，单次C.G到T.A的转变将精氨酸转变为色氨酸。这种替代解释了蛋白质电泳观察到的净负电荷的增加。这种Arg 106残留物在整个进化过程中是绝对保守的。已发表的LDH的高分辨率晶体结构表明，该残基位于一个环的铰链内，该环在底物和辅因子结合时关闭在亚基的活性位点上，并且在催化中具有直接作用。该变异酶的计算机建模表明，用色氨酸替代精氨酸残基不会引起活性位点结构的显著变化。然而，这种取代会导致酶活性的破坏，因为不带电的色氨酸侧链无法极化底物羰基键。 This would explain the loss of the catalytic function with maintenance of normal kinetic properties in the heterotetramers containing the variant subunits. The ability to maintain normal, tissue-specific kinetic properties could explain the absence of clinical manifestations in the homozygous LDHB GUA1 individuals.