载体蛋白质组学揭示了人脂肪细胞小泡表面聚合酶I和转录释放因子(PTRF)的靶向、磷酸化和特异性破碎。

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aboullaich N, Vainonen JP, Stralfors P, Vener AV

载体蛋白质组学揭示了人脂肪细胞小泡表面聚合酶I和转录释放因子(PTRF)的靶向、磷酸化和特异性破碎。

Biochem J. 2004 10月15日;383(Pt 2):237-48。

PubMed ID

15242332 (PubMed视图

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摘要

小泡是原代人脂肪细胞分离后形成的细胞质表面向外的封闭小泡，是质膜的特化内陷。这种形态允许通过蛋白水解和ms对相对膜表面的蛋白质进行鉴别，细胞外暴露的小泡特异性蛋白质CD36和含铜胺氧化酶隐藏在小泡内，抵抗胰蛋白酶处理。以细胞质为导向的小泡蛋白被胰蛋白酶有效地消化，产生可直接用MS测序的多肽。分离出与小泡胞质表面相关的外周蛋白，揭示了一组包含核定位信号、亮氨酸拉链结构域和PEST(富含脯氨酸、谷氨酸、丝氨酸和苏氨酸的氨基酸序列)结构域的蛋白，这些结构域与蛋白水解调控有关。特别是，PTRF(聚合酶I和转录释放因子)被发现是一种主要的小穴相关蛋白，并通过免疫荧光共聚焦显微镜证实了它与小穴蛋白的共定位。PTRF以完整形式和五种不同的截断形式存在于小穴表面。通过纳米喷雾-四极杆飞行时间质谱从全长PTRF中测序了包含这两个PEST结构域的肽段(44和45个氨基酸长)，但在蛋白的截断形式中未发现。在PTRF中鉴定了两个内源性钙蛋白酶特异性裂解位点;其中一个是在PEST领域。两个裂解位点两侧均有单磷酸化或双磷酸化序列。 The phosphorylation sites were localized to Ser-36, Ser-40, Ser-365 and Ser-366 in PTRF. Caveolae of human adipocytes are proposed to function in targeting, relocation and proteolytic control of PTRF and other PEST-domain-containing signalling proteins.

引用本文的药物库数据

多肽

的名字	UniProt ID
乙酰辅酶a乙酰转移酶，线粒体	P24752	细节
乙醛脱氢酶，线粒体	P05091	细节
琥珀酸脱氢酶[泛醌]黄蛋白亚基，线粒体	P31040	细节
膜一级胺氧化酶	Q16853	细节
细胞色素b-c1复合体亚基1，线粒体	P31930	细节
鸟嘌呤核苷酸结合蛋白G(s)亚单位α异构体短	P63092	细节
ATP合酶亚单位，线粒体	P06576	细节
膜联蛋白A5	P08758	细节
柠檬酸合成酶，线粒体	O75390	细节
鸟嘌呤核苷酸结合蛋白G(i)亚基α -1	P63096	细节
60kda热休克蛋白，线粒体	P10809	细节
3-酮酰基辅酶a巯基酶，线粒体	P42765	细节