优化酶联免疫吸附试验筛选配体的过氧物酶体proliferator-activated受体α。
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曹MC,李年代,崔HS,杨Y, Tae香港J, Kim SJ Yoon DY
优化酶联免疫吸附试验筛选配体的过氧物酶体proliferator-activated受体α。
Immunopharmacol Immunotoxicol。2009; 31 (3): 459 - 67。doi: 10.1080 / 08923970902785246。
- PubMed ID
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19263263 (在PubMed]
- 文摘
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过氧物酶体proliferator-activated受体(PPARs)是直接调节基因表达的转录因子结合到特定的受体激动剂。据报道,PPARalpha控制脂类代谢、炎症和动脉粥样硬化。最终由PPARalpha PPARalpha激活受体激动剂可以降低动脉粥样硬化的进展,减少冠心病的发病率。在这项研究中,我们优化酶联免疫吸附试验(ELISA)系统以屏幕假定的PPARalpha受体激动剂。这些方法都是基于PPARalpha的激活机制的配体结合PPARalpha诱导受体和转录co-activators之间的交互。在co-activators如SRC-1、TIF-2和p300,尽管ligand-unbound PPARalpha与p300更强大的约束力较低浓度的PPARalpha,配体PPARalpha与SRC-1有更具体的和强大的约束力。我们优化,开发了一个新的和有用的ELISA系统屏幕PPARalpha受体激动剂。Wy14,643和亚油酸,知名PPARalpha配体,增加PPARalpha和co-activators配体之间的绑定方式存在剂量依赖的相关性。在这个屏幕PPARalpha配体的ELISA方法,使用特定anti-PPARalpha n端抗体,完整的重组蛋白的人类PPARalpha但不是人类PPARalpha的配体结合域(精神的小黑裙),和his-tagged PPARalpha重组蛋白而不是GST-fused PPARalpha重组蛋白是关键因素。这个筛选系统的发展可能有助于发现PPARalpha配体等各种候选人化学库和植物化学物质。