磷酸化丝氨酸264阻碍活跃网站易访问性的E1组件人类丙酮酸脱氢酶的多酶的复杂。
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塞弗特F, Ciszak E, Korotchkina L, Golbik R, Spinka M, Dominiak P, Sidhu年代,布劳尔J,帕特尔女士,Tittmann K
磷酸化丝氨酸264阻碍活跃网站易访问性的E1组件人类丙酮酸脱氢酶的多酶的复杂。
生物化学,2007年5月29日,46 (21):6277 - 87。2007年5月3日Epub。
- PubMed ID
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17474719 (在PubMed]
- 文摘
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交界处的糖酵解和三羧酸循环细胞新陈代谢,丙酮酸脱氢酶多酶复合物(PDHc)催化丙酮酸的氧化脱乙酰辅酶a。在哺乳动物中,PDHc phosphorylation-dephosphorylation严格监管的三个丝氨酸残基thiamin-dependent丙酮酸脱氢酶(E1)组件。体内,失活的人类PDHc关联主要与264年丝氨酸磷酸化,它位于衬底的入口通道导致E1的活性部位。尽管激烈的调查,这失活的分子机制仍然神秘。这里,详细分析微观措施的人类野生型PDHc-E1催化和pseudophosphorylation变体Ser264Glu阐明了Ser264影响催化磷酸化。而内在反应的催化活性位点的丙酮酸脱羧几乎不变的现象,之前绑定的底物对酶的活性部位通过衬底通道和随后的还原乙酰化磷酸化E2组件严重放缓的变体。pseudophosphorylation变体Ser264Glu由x射线结晶学的结构揭示了没有差异的三维架构磷酸化循环或活性部位,与野生型相比酶。然而,通道主要活性部位的侧链部分阻塞残留264变体。以此类推,一个类似的衬底通道的阻塞可以预期结果Ser264的磷酸化。动力学和热力学结果结合Ser264Glu表明磷酸化屏蔽结构的活性部位实施空间和静电屏障衬底绑定和活性部位与E2耦合组件。 As a Ser264Gln variant, which carries no charge at position 264, is also selectively deficient in pyruvate binding and reductive acetylation of E2, we conclude that mostly steric effects account for inhibition of PDHc by phosphorylation.