类固醇受体辅激活蛋白-1介导的ERalpha转激活功能1 (AF-1)和AF-2之间的协同作用:AF-1 α -螺旋核心的需要以及N-和c端结构域之间的直接相互作用。
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Metivier R, Penot G, Flouriot G, Pakdel F
类固醇受体辅激活蛋白-1介导的ERalpha转激活功能1 (AF-1)和AF-2之间的协同作用:AF-1 α -螺旋核心的需要以及N-和c端结构域之间的直接相互作用。
分子内分泌杂志2001 11月;15(11):1953-70。
- PubMed ID
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11682626 (PubMed视图］
- 摘要
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ERalpha(或NR3A1)在配体结合后的转录活性是通过激活函数(AFs) AF-1和AF-2之间的协同作用和转录机制介导的。这是通过桥接辅激活剂如CEBP结合蛋白/p300和p160亚家族成员如类固醇受体辅激活蛋白-1 (SRC-1)实现的。我们之前在AF-1功能核心中发现了一个保守的潜在α -螺旋结构，并通过评估该区域内的人类ERalpha (hERalpha)点突变体，我们表明在转染实验中，该结构是SRC-1和hERalpha协同作用所必需的。我们报道了AF-1突变体和SRC-1之间的转录协同作用在AF-1敏感细胞(如HepG2)中被取消，而在CHO-K1细胞中降低了50%，CHO-K1细胞具有混合环境，对her α的AF-1和AF-2区域都敏感。谷胱甘肽- s -转移酶下拉实验表明，AF-1核心能够且足以使her α n端区域与SRC-1相互作用。有趣的是，在hERalpha配体结合域存在时，这种募集增强，被发现依赖于n端B域和配体结合域之间的直接相互作用。hERalpha的部分和完全激动剂促进了这种物理相互作用的另一个功能后果是n端结构域磷酸化状态的增加。4-羟他莫西芬(OHT)与her α c端区域的结合通过这种N-和c端相互作用在体外诱导了AF-1功能构象。通过使用oht敏感的人C3启动子的转染实验进一步证实了SRC-1介导的通路参与了由her α AF-1介导的转激活，实验表明，oht诱导的her α AF-1活性被SRC-1增强，并且需要AF-1 α -螺旋结构。总之，我们证明了AF-1和AF-2之间的协同作用部分是由AF-1 α -螺旋核和AF-2区域对SRC-1的协同招募所介导的，并且它是由B和c端结构域之间的直接相互作用所稳定的。 This interaction of SRC-1 with the AF-1 alpha-helical core is essential for both E2- and OHT-induced ERalpha activity.