CDK9通过丝氨酸81磷酸化调节AR启动子的选择性和细胞生长。
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Gordon V, Bhadel S, Wunderlich W, Zhang J, Ficarro SB, Mollah SA, Shabanowitz J, Hunt DF, Xenarios I, Hahn WC, Conaway M, Carey MF, Gioeli D
CDK9通过丝氨酸81磷酸化调节AR启动子的选择性和细胞生长。
Mol Endocrinol. 2010 Dec;24(12):2267-80。doi: 10.1210 / me.2010 - 0238。Epub 2010年10月27日。
- PubMed ID
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20980437 (在PubMed］
- 摘要
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先前我们确定S81是激素反应中雄激素受体(AR)上最高的化学计量磷酸化。为了探索这种磷酸化在生长中的作用，我们在LHS和LAPC4细胞中稳定表达野生型和S81A突变AR。与亲代细胞和S81A突变表达细胞相比，野生型AR表达增加的细胞生长更快，表明S81磷酸化的缺失限制了细胞的生长。为了探索S81如何调节细胞生长，我们测试了S81磷酸化是否调节AR转录活性。稳定表达野生型AR和S81A突变型AR的LHS细胞在内源性AR靶基因调控上存在差异，提示S81磷酸化调节启动子选择性。接下来，我们试图通过离子阱质谱分析细胞免疫沉淀中的ar相关蛋白来识别S81激酶。我们观察到细胞周期蛋白依赖性激酶(CDK)9与AR的关系。CDK9在体外磷酸化S81上的AR。磷酸化作用对S81是特异性的，因为CDK9没有磷酸化其他丝氨酸磷酸化位点上的AR。CDK9及其同源细胞周期蛋白cyclin T的过表达增加了细胞中S81的磷酸化水平。小干扰RNA敲除CDK9蛋白水平降低激素诱导的S81磷酸化。 Additionally, treatment of LNCaP cells with the CDK9 inhibitors, 5,6-dichloro-1-beta-D-ribofuranosylbenzimidazole and Flavopiridol, reduced S81 phosphorylation further, suggesting that CDK9 regulates S81 phosphorylation. Pharmacological inhibition of CDK9 also resulted in decreased AR transcription in LNCaP cells. Collectively these results suggest that CDK9 phosphorylation of AR S81 is an important step in regulating AR transcriptional activity and prostate cancer cell growth.