通过焦磷酸合酶:实时动力学和抑制氮含量在闪烁测定磷酸盐。

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格利克曼摩根富林明,施密德A

通过焦磷酸合酶:实时动力学和抑制氮含量在闪烁测定磷酸盐。

试验药物开发工艺。2007年4月,5(2):205 - 14所示。

PubMed ID

17477829 (在PubMed

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沃尔瑟姆,一个mix-and-read FlashPlate (PerkinElmer MA)测定的酶通过焦磷酸合成酶(FPP) (FPPS)是快速开发的测量步骤合成的FPP dimethylallyl焦磷酸(DMAPP)。化验使用DMAPP或香叶焦磷酸(GPP)和[(3)H] isopentenyl焦磷酸([(3)H] IPP)为基质,并测量了FPPS-catalyzed这些转化为[(3)H] FPP或[(3)H] GPP捕捉产品到phospholipid-coated闪烁的微量滴定板和监控产品形成电荷耦合装置成像仪。的Michaelis-Menten parameters-k (cat) GPP(38 /分钟)、K (m) IPP (0.6 microM),和K (m) GPP (0.7 microM)则使用困难相位分离技术与以前的研究一致。各种氮含量的50%抑制浓度的磷酸盐(N-BPs)测定和也与之前文献一致。没有先例,较弱的抑制(5 microM) non-N-BPs也被检测到。在预培养的研究中,N-BPs的力量,特别是zoledronate,慢慢地随着时间的推移增加了100倍。这种力量转变明显与zoledronate GPP的包容。Zoledronate对IPP竞争力。因此,这些研究与之前是一致的结构和热力学研究,并建议快速形成lower-affinity复杂zoledronate和GPP结合位点之间,紧随其后的是一个非常紧密的复杂的形成zoledronate和酶,不包括GPP的进一步结合。此外,一个底物的催化循环的第一步,DMAPP,被认定为1 microM抑制剂的第二步催化,这表明FPP两步合成由DMAPP监管。

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药物靶点

药物	目标	类	生物	药理作用	行动
Zoledronic酸	通过焦磷酸合酶	蛋白质	人类	是的	抑制剂	细节