重组视黄酸受体与类视黄酸X受体配体结合域杂合物的分离与表征。
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田凯，罗瑞思，林春林，李娥
重组视黄酸受体与类视黄酸X受体配体结合域杂合物的分离与表征。
生物化学。1997年5月13日;36(19):5669-76。
- PubMed ID
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9153406 (在PubMed］
- 摘要
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维甲酸的许多生物学效应是通过与核维甲酸受体(RARs)和类维甲酸X受体(RXRs)的异质络合物相互作用产生的。为了进一步研究这种相互作用，谷胱甘肽s -转移酶(GST)融合蛋白包含人类RXR α的配体结合域，通过谷胱甘肽-琼脂糖亲和层析，将人类RAR γ的配体结合域共化。纯化了保留完整配体结合能力的重组RAR-RXR配体结合域的配合物，并通过荧光滴定和光亲和标记表征了它们与各种类维生素a的相互作用。分析胞质维甲酸结合蛋白、CRABP-I和CRABP-II以及纯化的杂合物之间[3H]-全反式维甲酸的限制量分布表明，全反式维甲酸与CRABP-I和杂合物结合具有相当的亲和力，但与CRABP-II的亲和力约为10倍。用于治疗银屑病的芳香类维生素a阿维甲酸与纯化的杂合物结合相对较差，尽管它与CRABPs结合具有很高的亲和力。阿维甲酸从crabp中取代[3H]-全反式维甲酸，增加了杂合物的维甲酸占用率。这些结果表明，某些维甲酸可能会干扰内源性维甲酸在CRABPs和核受体之间的分布，从而影响维甲酸信号。纯化的重组配合物将为进一步分析RAR和RXR配体结合域之间的二聚界面结构提供一个有用的模型体系。