人类嘌呤核苷磷酸化酶缺乏症由单个碱基变化引起的。
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威廉姆斯SR Gekeler V, McIvor RS,马丁DW Jr
人类嘌呤核苷磷酸化酶缺乏症由单个碱基变化引起的。
J生物化学杂志。1987年2月15日,262 (5):2332 - 8。
- PubMed ID
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3029074 (在PubMed]
- 文摘
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嘌呤核苷磷酸化酶(PNP)缺乏症在人类早期功能的严重缺陷。从一个PNP-deficient突变基因的克隆病人是一个近亲交配的后代。突变的外显子和内含子/外显子边界PNP型基因测序,与野生型相比cDNA序列。单个碱基差异被发现的突变基因的编码区,G第三外显子的过渡。这一基地突变改变了密码子在89位置Glu赖氨酸,发表的结果与之前是一致的肽图数据。病人被证明是单一基地autozygous突变的基础上合成寡聚物基因组DNA的杂交的摘要。哺乳动物表达载体构建包含整个突变基因的转录调控下自己的启动子。在另一个建筑,单基地突变是恢复野生型序列通过体外诱变。一个包含提取等电聚焦凝胶的细胞转染突变和恢复PNP型基因染色PNP型活动的结果。类似的蛋白质凝胶涂抹在硝化纤维膜,和免疫反应性的人类PNP型蛋白是可视化。 Cells transfected with the mutant gene contained no human PNP activity, but expressed immunoreactive PNP which focused at an abnormally alkaline pI. Cells transfected with the reverted gene expressed human PNP activity which co-focused with human PNP from a HeLa cell control, proving that the observed single base change was responsible for the loss of catalytic function.