定点诱变建立半胱氨酸- 110作为人类gamma-glutamyl水解酶酶活性至关重要。
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瑞安TJ Chave KJ, Galivan J
定点诱变建立半胱氨酸- 110作为人类gamma-glutamyl水解酶酶活性至关重要。
j . 1999年11月1日;343 Pt 3:551-5。
- PubMed ID
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10527932 (在PubMed]
- 文摘
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Gamma-glutamyl水解酶(GH)、水解Gamma-glutamyl共轭的叶酸,是维护细胞的关键酶folylpolyglutamate浓度。GH的催化机理尚不清楚。与先前的报告相一致,GH sulphydryl-sensitive,我们发现重组人类GH被碘乙酸抑制,表明至少有一个半胱氨酸对活动很重要(Rhee、Lindau-Shepard Chave, Galivan和瑞安(1998)摩尔。杂志,53岁,1040 - 1046]。使用定点诱变,cDNA人类GH改变编码四个不同的蛋白质与丙氨酸四个半胱氨酸残基的变化之一。三个突变体蛋白的活动类似于野生型GH和被碘乙酸抑制,而C110A突变没有活动。半胱氨酸- 110是守恒的人类,老鼠和老鼠GH氨基酸序列。野生型蛋白和所有四个突变体有类似的固有荧光光谱,表明没有重大结构性变化。这些结果表明,半胱氨酸- 110是必不可少的酶活性,表明GH半胱氨酸肽酶。这些研究是第一个识别必要的半胱氨酸残基的酶,并提供一个框架来确定的开始催化机制,重要的定义GH治疗目标。