分子建模和定点诱变定义人类伽马谷酰基水解酶催化的主题。
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Chave KJ,钻即Galivan J,瑞恩TJ
分子建模和定点诱变定义人类伽马谷酰基水解酶催化的主题。
生物化学杂志。2000年12月22日,275 (51):40365 - 70。
- PubMed ID
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11005824 (在PubMed]
- 文摘
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人类gamma-glutamyl水解酶(hGH)是一个中央folyl和antifolylpoly-gamma-glutamate代谢酶,催化功能的基质的gamma-glutamyl链的乳沟。我们以前报道,半胱氨酸- 110是必不可少的活动。使用hGH的序列作为一个查询,调整搜索蛋白质数据库是使用SSearch和TPROBE项目。必威国际app显著的相似性被发现hGH和谷氨酰胺之间amidotransferase I型大肠杆菌[氨基甲酰磷酸合成酶的领域。由此产生的假说的催化褶皱hGH类似于这个领域的折叠[氨基甲酰磷酸合成酶。该模型预测,半胱氨酸- 110 hGH的活性部位的亲核试剂与残留形成催化三分子- 220和glu - 222。hGH突变体C110A, H220A, E222A准备。与模型一致,突变体C110A和H220A是不活跃的。然而,E222A hGH的V (max)突变体相对于野生型酶减少只有6倍。模型还预测,他- 171 hGH可能参与衬底绑定。 The H171N hGH mutant was found to have a 250-fold reduced V(max). These studies to determine the catalytic mechanism begin to define the three dimensional interactions of hGH with poly-gamma-glutamate substrates.