人蛋氨酸腺苷转移酶(MAT II) β调控亚基的克隆、表达和功能表征。
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勒格罗斯HL Jr，哈利姆AB，盖勒AM，科特布M
人蛋氨酸腺苷转移酶(MAT II) β调控亚基的克隆、表达和功能表征。
中国生物化学杂志，2000年1月28日;
- PubMed ID
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10644686 (PubMed视图］
- 摘要
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MAT II是甲硫氨酸腺苷转移酶(MAT)的肝外形式，由催化α (2)/ α(2’)亚基和非催化β亚基组成，被认为具有调节功能。编码人类MAT II β亚基的全长cDNA被克隆出来，编码一个334个氨基酸的蛋白质，计算分子量为37552。序列同源性分析表明，与催化还原tdp链糖的细菌酶相似。将β亚基cDNA克隆到pQE-30表达载体中，在大肠杆菌中表达的重组His标记蛋白被人MAT II、复制天然β亚基蛋白序列的合成肽和rbeta蛋白的抗体识别。在MAT II α(2)或β亚基之间没有交叉反应。没有一种抗-亚基抗体与大肠杆菌宿主细胞的蛋白质提取物反应，这表明这些细菌没有-亚基蛋白。有趣的是，rbeta亚基与大肠杆菌以及人类MAT α亚基相关。这种结合改变了两种酶的动力学性质，并降低了l -蛋氨酸MAT的K(m)。总之，这些数据表明我们已经克隆并表达了人类MAT II β亚基，并证实了其长期以来被怀疑的调节功能。这一知识提供了一种在哺乳动物细胞中调节MAT活性和AdoMet水平的分子手段。