人肝丝氨酸-丙酮酸转氨酶cDNA的克隆及其核苷酸序列。
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西山K，伯斯坦G，小田T，市山A
人肝丝氨酸-丙酮酸转氨酶cDNA的克隆及其核苷酸序列。
生物化学学报。1990年11月26日;194(1):9-18。
- PubMed ID
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2253628 (PubMed视图］
- 摘要
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以大鼠线粒体Ser-PyrAT cDNA片段为探针，通过筛选人肝脏cDNA文库，获得人肝脏丝氨酸-丙酮酸转氨酶(Ser-PyrAT)的克隆cDNA。从5万个转化者中分离出两个克隆体。两个克隆都含有大约1.5 kb的cDNA插入，并且在限制性内切酶作图和DNA测序中几乎完全重叠。从cDNA克隆中确定了人肝脏Ser-PyrAT编码mRNA的核苷酸序列。该mRNA包含至少1487个核苷酸，并编码由分子质量为43,039 Da的392个氨基酸残基组成的多肽。经酸水解测定，纯化酶的氨基酸组成与cDNA核苷酸序列的氨基酸组成吻合较好。在体外翻译来自分离克隆之一pHspt12的mRNA，以及从人肝脏中提取的mRNA，产生了43 kDa的产物，该产物与兔抗(大鼠线粒体Ser-PyrAT)血清反应。将推导出的人Ser-PyrAT与成熟型大鼠线粒体Ser-PyrAT氨基酸序列进行比较，发现同源性为79.3%。虽然人类Ser-PyrAT似乎是作为成熟尺寸合成的，但人类Ser-PyrAT mRNA的5'-非编码区包含一个核苷酸序列，如果翻译，该序列将编码一个氨基酸序列，类似于大鼠线粒体Ser-PyrAT前体n端延伸肽的氨基酸序列。