功能之间的合作中最常见的多态性人类丙氨酸:乙醛酸转氨酶和四个最常见的致病突变。
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Lumb MJ, Danpure CJ
功能之间的合作中最常见的多态性人类丙氨酸:乙醛酸转氨酶和四个最常见的致病突变。
J生物化学杂志。2000年11月17日,275(46):36415 - 22所示。
- PubMed ID
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10960483 (在PubMed]
- 文摘
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常染色体隐性障碍主要hyperoxaluria 1型(PH1)是由肝脏特异性pyridoxal-phosphate-dependent酶的缺乏引起的丙氨酸:乙醛酸转氨酶(AGT)。大量的突变和多态性的基因编码AGT已确定,但只有少数情况下基因型和表现型之间的因果关系证明。在这项研究中,我们已经确定的影响最常见的天然氨基酸替换(正常的多态性和致病突变)属性,尤其是特定的催化活性,纯化重组AGT。本文给出的结果显示:1)正常的人类His-tagged AGT可以表达在大肠杆菌的高水平和纯化正确折叠,化学活性和催化地活动状态;2)存在的常见P11L多态性降低纯化重组AGT的具体活动是由三个因素造成的;3)agt包含四个最常见的PH1-specific突变(G41R, F152I、G170R I244T)都是可溶性和催化地活跃在P11L多态性的缺席,但是在它的存在导致蛋白质不稳定和聚合成包涵体;4)天然和人工氨基酸替换,导致哺乳动物细胞peroxisome-to-mitochondrion AGT mistargeting也导致大肠杆菌不稳定和聚合;和5)PH1-specific G82E突变破坏AGT催化活性通过干扰代数余子式绑定,也是公认的代数余子式的人工K209R突变Shiff基地的形成。讨论了这些结果的等位基因频率高(大约20%)P11L多态性及其重要性的判断PH1的表型变异的表现。