具有不同同型半胱氨酸表型的兄弟姐妹中的相同基因型:使用改进的细菌表达系统鉴定半胱硫氨酸-合成酶的三个突变。
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德·弗朗西斯R，科齐奇V，麦金尼斯RR，克劳斯JP
具有不同同型半胱氨酸表型的兄弟姐妹中的相同基因型:使用改进的细菌表达系统鉴定半胱硫氨酸-合成酶的三个突变。
中华医学杂志。1994 7;3(7):1103-8。
- PubMed ID
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7981678 (查看PubMed］
- 摘要
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我们使用一种显著改进的细菌突变筛选方法，确定了三个具有吡哆辛反应性同型半胱氨酸尿的兄弟姐妹的半胱硫氨酸-合成酶(CBS)缺乏的分子基础。尽管CBS基因型相同，但兄弟姐妹的表型表达不同。父系等位基因包含一对连锁突变C233G和G306C，对应多肽链上的P78R和K102N。这些物质一起灭活了酶;然而，单独表达时，它们减少了约一半的活性。单母系突变G715A (E239K)有效地消除了CBS活性。患者成纤维细胞提取物中无CBS亚单位;然而，用含有患者CBS cDNA的质粒转化的大肠杆菌表达亚单位，尽管数量减少。母亲为专性杂合子，无同型半胱氨酸尿症状;尽管如此，她的成纤维细胞提取物缺乏CBS蛋白和活性。 We conclude that fibroblast levels of CBS are only partially effective as prognosticators of disease severity and that it is important to test the in vivo response to vitamin B6 in all cases of homocystinuria, including those in which the mutations lead to the absence of the enzyme in cultured fibroblasts.