人类thymidylate合酶在大肠杆菌的表达。
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Davisson VJ, Sirawaraporn W,桑蒂DV
人类thymidylate合酶在大肠杆菌的表达。
生物化学杂志。1989年6月5日;264 (16):9145 - 8。
- PubMed ID
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2656695 (在PubMed]
- 文摘
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cDNA克隆编码thymidylate合成酶(TS)隔绝人类t细胞库和修改的5 '非翻译区将几个独特的克隆网站。的基因已被克隆为盒式成几个大肠杆菌表达向量没有提供检测大量的酶。一个成功的方法开发的本构大肠杆菌表达载体用于干酪乳杆菌的酶。115碱基对的5 '非翻译区l .干酪乳杆菌TS含有核糖体结合位点和其他监管序列融合了人类TS基因的编码区提供了一个构建大肠杆菌中表达。表达水平的进一步提高通过改变第一个90个碱基对的核苷酸序列满足常见的大肠杆菌的密码子使用。在我们最好的表达系统,催化地活跃的人类TS表达的水平代表了大约1.6%的总可溶性蛋白。重组人类TS纯化和特征;除了一个伴阻断组的存在,这种酶有物理和动力学性质类似于酶从人类细胞分离。