描述人类核苷酸还原酶酶学性质的全酶体外重组从hRRM1 hRRM2, p53R2子单元。
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达维希邱W,周B, D,邵J,日圆Y
描述人类核苷酸还原酶酶学性质的全酶体外重组从hRRM1 hRRM2, p53R2子单元。
生物化学Biophys Res Commun。2006年2月10日,340 (2):428 - 34。Epub 2005年12月15日。
- PubMed ID
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16376858 (在PubMed]
- 文摘
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核苷酸还原酶(RR)是一个高度管制的脱氧核苷酸酶合成途径。RR负责新创转换核糖核苷二磷酸,脱氧核苷二磷酸,这对DNA合成和修复至关重要。除了两个子单元,hRRM1 hRRM2, p53R2是一个新发现的RR家庭成员,用紫外线诱导p53-dependent的方式。理解RR亚基的分子间相互作用,我们采用真核表达系统表达和净化所有三个子单元。体外重建后,[(3)H] CDP的结果减少试验表明真核重组hRRM2和p53R2蛋白质可能与hRRM1形成功能性RR全酶。重组RR活动时间和反应速率达到高原期40分钟后孵化。不管浓度,RR全酶重组从p53R2 hRRM1只能达到约40 - 75%的动能hRRM2和hRRM1的活动。合成c端heptapeptide竞争化验证实hRRM2, hRRM1 p53R2共享相同的结合位点,但结合位点hRRM1证明更高的亲和力比p53R2 hRRM2。变构调节试验,激活或抑制的影响hRRM1 ATP或dATP建议这些效应可以调节RR活动独立不同的RR小单元。综上所述,RR全酶真核表达系统将提供一个非常有用的工具来理解RR活动的分子机制及其子单元的相互作用。