了解Leu22变体在甲氨蝶呤耐药性中的作用:比较野生型和Leu22Arg变体小鼠和人二氢叶酸还原酶三元晶体配合物与甲氨蝶呤和NADPH。
文章的细节
-
引用
复制到剪贴板 -
科迪V，卢夫特JR，潘伯恩W
了解Leu22变体在甲氨蝶呤耐药性中的作用:比较野生型和Leu22Arg变体小鼠和人二氢叶酸还原酶三元晶体配合物与甲氨蝶呤和NADPH。
晶体学报。2005 2月;61(Pt 2):147-55。Epub 2005 1月19日。
- PubMed ID
-
15681865 (PubMed视图］
- 摘要
-
结构数据达到2.5 A分辨率，首次对小鼠二氢叶酸还原酶(mDHFR)的抗甲氨蝶呤的Leu22Arg (L22R)变体进行了全面分析，该变体与甲氨蝶呤(MTX)和辅因子NADPH结晶为三元配合物。这些结果与L22R人DHFR (hDHFR)的MTX和NADPH三元配合物以及小鼠和人野生型DHFR酶的MTX和NADPH三元配合物进行了比较。mDHFR Arg22的构象是这样的，它与Asp21, Trp24和一个结构水分子发生氢键接触，这是在L22R hDHFR三元配合物中没有观察到的。这些数据表明，无论是小鼠还是人类DHFR，野生型和L22R变体的结构差异不大;然而，物种之间存在显著差异。对比这些结构可以发现，mDHFR的活性位点比hDHFR的活性位点大。在mDHFR中，MTX的位置向螺旋C方向移动了0.6 A(残基59-65)，相对于在hDHFR三元配合物中观察到的位置，它又从活性位点移动了1.2 A。在L22R变异体mDHFR结构中，MTX与Ile7、Val115和Tyr121的保守残基接触时间较L22R变异体人类DHFR结构短。这些接触在两种野生型酶中是相似的。小鼠和人类DHFR复合物与相同配体和辅因子结合的比较意外结果说明了详细研究几种酶的重要性，即使它们之间存在高度的序列同源性。 These data suggest that the differences in binding interactions of the L22R variant are in agreement with the weaker binding affinity for MTX in the variant enzymes; the larger size of the binding site in mDHFR supports the observation that the binding affinity of MTX for L22R mDHFR is significantly weaker than that of the L22R hDHFR enzyme.