人类过氧化物酶病多功能酶2型。定点诱变研究表明的重要性两个质子溶剂残留2-enoyl-CoA水合酶2的活动。
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秦YM, Haapalainen Kilpelainen SH, Marttila女士,人类可,Glumoff T,诺维科夫先生DK, Hiltunen JK
人类过氧化物酶病多功能酶2型。定点诱变研究表明的重要性两个质子溶剂残留2-enoyl-CoA水合酶2的活动。
J生物化学杂志。2000年2月18日,275 (7):4965 - 72。
- PubMed ID
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10671535 (在PubMed]
- 文摘
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机会acyl-CoAs的哺乳动物的过氧化物酶体可以通过多功能酶发生1型(MFE-1)或2型(MFE-2),这两种催化反的水化和3-hydroxyacyl-CoA脱氢,但相反的手性特征。氨基酸序列比对的2-enoyl-CoA水合酶2域与其他MFE-2s揭示人类MFE-2守恒的质子溶剂残留:酪氨酸- 347,glu - 366, asp - 370, - 406, glu - 408,酪氨酸- 410,asp - 490,酪氨酸- 505,asp - 510, - 515, asp - 517, - 532。调查他们潜在的角色在催化,每个残留在定点诱变,取而代之的是丙氨酸和由此产生的结构在酵母进行互补。额外的筛选后,野生型和noncomplementing E366A和D510A变体是表达和特征。纯化蛋白质二级结构元素相似,相同的亚基组成。E366A变体有k(猫)/ k (m)价值100倍低于野生型MFE-2 pH值5,而D510A变体是不活跃的。asp - 510是嵌入在一个小说水合酶2主题在水合酶2蛋白。数据表明,水合酶2反应催化MFE-2需要两个质子溶剂残留,glu - 366和asp - 510,这表明他们的催化作用可能相当于两个催化水合酶1的残留物。