与Ca2+钙调素配合物中orai1钙调素结合域的晶体结构显示出独特的结合模式。
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刘勇，郑x, Mueller GA, Sobhany M, DeRose EF，张勇，London RE, Birnbaumer L
与Ca2+钙调素配合物中orai1钙调素结合域的晶体结构显示出独特的结合模式。
中国生物化学杂志，2012 12月14日;287(51):43030-41。doi: 10.1074 / jbc.M112.380964。Epub 2012 10月29日。
- PubMed ID
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23109337 (PubMed视图］
- 摘要
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Orai1是一种质膜蛋白，其四聚体形式负责钙从细胞外环境流入细胞质，以响应与Ca(2+)消耗传感器STIM1的相互作用。紧接着是一个快速的Ca(2+)。钙调素(CaM)依赖性抑制，由CaM结合到称为钙调素结合域(CMBD)的Orai1区域引起。Orai1和CaM在原子水平上的相互作用仍然未知。在这里，我们报告一个凸轮晶体结构。Orai1-CMBD复合物显示一个CMBD与CaM的c端叶结合，不同于其他CaM-靶蛋白复合物，其中CaM的N端和c端叶(CaM-N和CaM- c)都参与目标结合。Orai1-CMBD主要通过疏水相互作用与CaM-C结合，主要涉及Orai1-CMBD的残基Trp(76)与CaM-C的疏水口袋相互作用。然而，NMR数据、等温滴定量热数据和下拉实验表明CaM-N和CaM-C都能结合Orai1-CMBD, CaM-N的亲和力比CaM-C弱约4倍。通过对Orai1-CMBD(W76E)突变体的拉下分析、凝胶过滤层析数据和NOE信号分析，CaM-N和CaM-C均能结合Orai1-CMBD。因此，我们的研究支持了CaM与Orai1- cmbd不同寻常的1:2扩展结合模式，并量化了Orai1与CaM的亲和力。 We propose a two-step mechanism for CaM-dependent Orai1 inactivation initiated by binding of the C-lobe of CaM to the CMBD of one Orai1 followed by the binding of the N-lobe of CaM to the CMBD of a neighboring Orai1.