一个方法来识别丝氨酸激酶基质。一种蛋白激酶磷酸化小说脂肪细胞蛋白质的Rab GTPase-activating蛋白(GAP)域。
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凯恩,佐H,刘SC, Asara JM,莱恩WS,加纳CC, Lienhard通用电气
一个方法来识别丝氨酸激酶基质。一种蛋白激酶磷酸化小说脂肪细胞蛋白质的Rab GTPase-activating蛋白(GAP)域。
生物化学杂志。2002年6月21日;277 (25):22115 - 8。2002年5月6日Epub。
- PubMed ID
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11994271 (在PubMed]
- 文摘
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本研究描述了一个方法特定丝氨酸激酶的底物的识别。产生的抗体的特定phosphomotif激酶用于分离磷酸化底物通过免疫沉淀反应,和串联质谱识别分离出蛋白质的肽。该方法应用于蛋白激酶的底物的识别一种蛋白激酶,特别是磷酸化RXRXXS / T的主题。3 t3-l1脂肪细胞胰岛素激活一种蛋白激酶,处理和公认的一种蛋白激酶的底物蛋白质分离与磷形成的抗体免疫沉淀反应这一主题。这导致了小说160 kda的识别一种蛋白激酶的底物。160 kda的基质Akt,指定AS160, Rab空白领域。重组AS160被证明是一种蛋白激酶的底物,和磷酸化两个站点,在RXRXXS / T图案,都被质谱和突变。胰岛素治疗引起的脂肪细胞AS160重新分配的低密度细胞溶质微粒体。