利用β -内酰胺酶融合载体研究青霉素结合蛋白1B在大肠杆菌细胞质膜中的组织。
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艾德曼A，鲍勒L，布鲁姆-史密斯JK，斯普拉特BG
利用β -内酰胺酶融合载体研究青霉素结合蛋白1B在大肠杆菌细胞质膜中的组织。
Mol Microbiol, 1987 7月;1(1):101-6。
- PubMed ID
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3330753 (PubMed视图］
- 摘要
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成熟型TEM β -内酰胺酶的编码区被融合到青霉素结合蛋白1B (PBP 1B)基因编码区内的随机位置，并确定了100个框架内融合的融合节点上的核苷酸序列。所有至少含有PBP 1B的nh2 -末端94残基的融合蛋白为大肠杆菌的单个细胞提供了大量的氨苄西林耐药，这表明β -内酰胺酶部分已转移到周质。含有少于或等于63个PBP 1B残基的融合蛋白具有β -内酰胺酶活性，但不能保护大肠杆菌单细胞免受氨苄西林的侵袭，这表明这些融合蛋白的β -内酰胺酶部分仍保留在细胞质中。β -内酰胺酶融合方法为PBP 1B的组织提出了一种模型，其中蛋白通过一个疏水跨膜段(残基64-87)嵌入细胞质膜中，带有一个短的nh2末端结构域(残基1-63)，多肽的剩余部分(残基88-844)暴露在细胞质膜的质周侧。PBP 1B的组织模型得到了实验的支持，实验表明，该蛋白被从细胞膜的质周侧添加的蛋白酶K完全消化，而受到来自膜的细胞质侧的蛋白酶攻击，其大小仅略有减小。