溶性生物活性的纯化和表征伴人类促甲状腺素受体细胞外的域。
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Cornelis年代,Uttenweiler-Joseph年代,Panneels V, Vassart G, Costagliola年代
溶性生物活性的纯化和表征伴人类促甲状腺素受体细胞外的域。
生物化学。2001年8月21日,40 (33):9860 - 9。
- PubMed ID
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11502179 (在PubMed]
- 文摘
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的伴ectodomain人类TSH受体的表达在CHO细胞表面的glycosylphosphatidylinositol-anchored分子包含一个10-residue组氨酸标签接近它的C末端。可溶性ectodomain可以释放的细胞治疗glycosylphosphatidylinositol-phospholipase C和纯化cobalt-Sepharose色谱明显的同质性。两个nanomoles获得的材料,适用于质谱分析。这使得识别的四个六个潜在N-glycosylation网站作为有效糖化。比例的纯化可溶性ectodomain显示特定的绑定(125)标TSH,首次允许古典饱和绑定的性能实验。两类的高亲和性结合位点识别:网站,K (d) 0.014 nM;site B K (d) 0.83海里。网站的重要性,其亲和力是holoreceptor远高于在完整细胞表面的,仍有待澄清。纯化ectodomain是能够有效地抑制甲状腺刺激免疫球蛋白的活动从甲状腺机能亢进的患者。它允许计算这些病人的血清中免疫球蛋白的含量,给值10 microg /毫升。 Contrary to all currently available assays, the soluble ectodomain of the TSH receptor purified in a functionally competent conformation allows direct studies of its interactions with TSH and autoantibodies and opens the way to structural studies.