Her-2/neu (ERBB2)基因内含子的分子克隆与测序。
文章的细节
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引用
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Sarkar FH, Ball DE, Li YW, Crissman JD
Her-2/neu (ERBB2)基因内含子的分子克隆与测序。
DNA细胞生物学。1993 9月12(7):611-5。
- PubMed ID
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8104414 (查看PubMed]
- 摘要
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这篇报道记录了Her-2/neu基因一个未知内含子的克隆和测序,并比较了三种不同的高效PCR克隆策略。尽管使用钝端连接策略已经取得了成功的结果,但TA克隆系统(Invitrogen, CA)在我们手中使用pcr扩增的Her-2/neu (ERBB2)基因DNA片段提供了最好的结果,其中包含一个未报道的内含子。TA克隆系统操作简单,克隆出的DNA无需再亚克隆到M13载体中即可进行测序。此外,这种克隆策略不需要(i)引物设计中任何限制性内切位点的预先选择,(ii) PCR限制性内切后消化,和/或(iii) PCR扩增DNA的凝胶纯化。新鉴定和测序的Her-2/neu neu内含子DNA (GenBank登录号:No。M95667)可用于生物标本中Her-2/neu基因分析的引物设计。因此,我们推荐TA克隆系统作为克隆PCR产生的任何DNA片段的首选。