潜在使用estrogen-glucocorticoid嵌合体作为药物筛选组织选择性雌激素受体的活动。
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丸BS,托拜厄斯JH,河流C, Caunt CJ,诺曼先生,麦卡德尔CA
潜在使用estrogen-glucocorticoid嵌合体作为药物筛选组织选择性雌激素受体的活动。
骨头。2009年1月,44(1):102 - 12所示。doi: 10.1016 / j.bone.2008.09.016。Epub 2008年10月11日。
- PubMed ID
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18976723 (在PubMed]
- 文摘
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SERMs充当ER受体激动剂在其他组织骨尽管他们对立的属性。以及抑制骨重建,这种效应可能涉及刺激成骨细胞活动,从最近的体内研究的证据。然而,探索这一行动进展一直受限于缺乏准确的体外模型。据报道,例如,ER拮抗剂刺激记者分析基于雌激素靶基因在成骨细胞,相反他们体内抑制的影响。我们检验评估全球方面的呃呃激活的功能提供了一个更准确的反映成骨细胞,基于形态学的使用和/或转录家里与绿色荧光蛋白(GFP)受体嵌合体。Osteoblast-like (ROS和U2OS)和乳腺癌MCF7细胞转染与人类ERalpha-GFP融合蛋白,并与ER受体激动剂治疗(17 beta雌二醇,dienestrol)拮抗剂(ICI 182780年和164015年ZK)和SERMs(三苯氧胺、雷洛昔芬4-hydroxytamoxifen (4-HT)和hexestrol)。我们研究了这些结构的细胞上荧光显微镜、核流动光漂白后荧光恢复(收紧),和全球转录激活雌激素使用ERE-luc记者。SERMs导致osteoblast-like ERE-luc活动适度增加细胞(但不是在乳腺癌细胞),和减少核流动在乳腺(但不是osteoblast-like)细胞。这些研究被重复使用绿色荧光蛋白嵌合体的人类GR配体结合域(精神的小黑裙)取代了人类ERalpha小黑裙(ERGR-GFP),加上GRE-luc记者。有趣的是,SERMs既增加细胞质ERGR-GFP核易位,并在osteoblast-like GRE-luc记者活动,(但不是乳房)细胞。 Indeed, transcriptional responses to SERMs in osteoblast-like cells were considerably greater with the ERGR/GRE-luc than the ERalpha/ERE-luc system, 4-HT inducing 300 and 25% increases in reporter activity respectively. ER antagonists were entirely without effect. We conclude that evaluation of global estrogenic activity, as opposed to activation of a specific target gene, provides a more accurate read-out for osteoblast stimulation. In particular, ERGR-mediated GRE-luc activity provides a high signal response to estrogen agonists and SERMs, in a cell context dependent manner closely resembling that observed in vivo. Further studies utilising this system are justified to explore the mechanistic basis for estrogenic stimulation of osteoblast activity, and to identify newer SERMs capable of targeting this activity.