鉴定磷酸化位点的铰链区人类孕激素受体和额外的伴磷酸化网站。
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诺特助教,Orkiszewski RS,库克RG,爱德华兹DP,魏盖尔问
鉴定磷酸化位点的铰链区人类孕激素受体和额外的伴磷酸化网站。
生物化学杂志。2001年3月16日,276 (11):8475 - 83。Epub 2000年12月7日。
- PubMed ID
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11110801 (在PubMed]
- 文摘
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我们之前报道的识别七体内磷酸化网站伴地区人类的孕激素受体(PR)。从我们以前的体内研究,很明显,一些此处则仍然不明。特别是,我们希望确定人类公关是否包含一个磷酸化网站枢纽区,做其他类固醇受体包括鸡肉公关,人类雄激素受体、雌激素受体和老鼠。以前,有问题的胰蛋白酶乳沟网站阻碍我们的能力来检测磷酸化网站在很大不完整的胰蛋白酶的肽。使用质谱和体外磷酸化,我们已经确定了六个未知磷酸化在人类公关网站。使用nanoelectrospray电离质谱分析,我们发现了两个新的体内磷酸化网站,Ser(20)和爵士(676),在人类baculovirus-expressed公关。爵士(676)类似于铰链网站确认在其他类固醇受体。此外,前体离子扫描识别另一个此处则包含爵士(130)支持(131),一个可能的候选人磷酸化。体外磷酸化的公关Cdk2显示五个额外的体外Cdk2磷酸化网站:爵士(25),爵士(213),用力推(430),(554),和爵士(676)。至少两个,爵士(213)和(676)爵士,是真实的体内。我们确认Cdk2-phosphorylated肽的存在包含爵士(213)从体内标记公关T47D细胞,表明这是一个体内的网站。我们的综合研究表明,大部分,如果不是全部,人类Ser-Pro图案的公关是磷酸化的网站。 Taken together, these data indicate that the phosphorylation of PR is highly complex, with at least 14 phosphorylation sites.