异丁基辅酶a脱氢酶的鉴定及其在人体中的缺陷。
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Nguyen TV, Andresen BS, Corydon TJ, Ghisla S, Abd-El Razik N, Mohsen AW, Cederbaum SD, Roe DS, Roe CR, Lench NJ, Vockley J
异丁基辅酶a脱氢酶的鉴定及其在人体中的缺陷。
中国生物医学杂志，2002年9月- 10月;77(1-2):68-79
- PubMed ID
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12359132 (PubMed视图］
- 摘要
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酰基辅酶a脱氢酶(ACDs)是催化酰基辅酶a酯α、β脱氢的相关酶家族。在支链氨基酸代谢中活跃的两个同源物先前已被鉴定。我们利用在大肠杆菌中的表达产生了一个以前未鉴定的acd样序列(ACAD8)，并确定了其底物特异性。以异丁基- coa、(s) 2-甲基丁基- coa和n-丙酰- coa为底物纯化的重组酶的k(cat)/ k(m)分别为0.8、0.23和0.04 (microM(-1)s(-1))。因此，这种酶是异丁基辅酶a脱氢酶。以前曾描述过一个病人，其成纤维细胞在缬氨酸氧化中表现出特定的缺陷。从患者成纤维细胞mRNA中扩增的ACAD8 cDNA与对照细胞序列相比，在ACAD8编码区有一个单核苷酸变化(905G> a)，是纯合子的。这编码了全长蛋白中的Arg302Gln取代(成熟蛋白中的280位)，分子建模预测该位置在亚基相互作用中很重要。突变酶在大肠杆菌中表达时稳定，但不活跃。它也是稳定的，并适当地靶向线粒体，但在哺乳动物细胞中表达时不活跃。 These data confirm further the presence of a separated ACD in humans specific to valine catabolism (isobutyryl-CoA dehydrogenase, IBDH), along with the first enzymatic and molecular confirmation of a deficiency of this enzyme in a patient.